高效液相色谱在药物分析的应用实例
《高效液相色谱在药物分析的应用实例》·南京科捷分析仪器有限公司
例一、磺胺分析
样 品：磺胺、磺胺嘧啶、磺胺甲基异噁唑和甲氧苄氨嘧啶的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，740色谱数据处理机
检测器：UV 481型紫外检测器，波长240nm
色谱柱：μ-Bondapak C18 , 5μm，柱长25 cm，柱径4.6 mm
流动相：由KH2PO4（0.05mol/L）和Na2HPO4（0.05 mol/L）以及MeOH所组成，其用量比例为200:10:165，
流 速：1mL/min
进 样：10μL
结 果：所有组分在6min之内全部流出，各组分完全分离，组分出峰顺序为：磺胺保留时间为2.60 min, 磺胺嘧啶保留时间为3.18 min、磺胺甲基异噁唑保留时间为4.33 min,甲氧苄氨嘧啶保留时间为5.19min。
例二、银杏内酯分析
样 品：含银杏苦内酯等4种物质的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪
配有570自动进样器，Rheadyane 77251进样阀，HP化学工作站
检测器：500型ELSD Alltech 蒸发光散射检测器
漂移管温度为91℃，氮气流速为2.75L/min
色谱柱：Platinum OPS，5μm，柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：水:甲醇:四氢呋喃 = 75:20:10
流 速：1mL/min
进 样：10μL
结 果：所有组分在15min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为银杏苦内酯C, 峰2为白果内酯, 峰3银杏苦内酯A, 峰4为银杏苦内酯B。
例三、脂肪酸甲酯分析
样 品：含5种脂肪酸甲酯的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站
检测器：500型ELSD Alltech 蒸发光散射检测器
漂移管温度为45℃，氮气流速为1.5L/min
色谱柱：Silver Impregnated Ion-Exchange ,柱长25cm，柱径4.6mm
流动相：乙腈:甲醇 = 2:98
流 速：0.75mL/min
进 样：10μL
结 果：所有组分在10min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为C18：0脂肪酸甲酯，峰为C18：1脂肪酸甲酯，峰3为C18：2脂肪酸甲酯，峰4为C18：3脂肪酸甲酯，峰1为C20：4脂肪酸甲酯。
例四、嘌呤分析
样 品：取1mL血浆加入200μL的1.98mol/L的高氯酸（GR），再加入600μL蒸馏水和200μL的1.47mol/L的别嘌呤醇（内标），用旋转混合器振摇10s于1200g离心10min，取上层清液备分析用。
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站
检测器：UV紫外检测器，254nm
色谱柱：μBondapsk C18 ，10μm，柱长30cm，柱径3.9mm
流动相：0.02mol/L的磷酸二氢钾，pH = 2.2
流 速：2.0mL/min
进 样：10μL
结 果：所有组分在12min之内全部流出，各组分分离完全，保留时间依次为：尿嘌呤为3.18min（峰1），腺嘌呤为3.21 min（峰2），次黄嘌呤为3.90 min（峰3），5-羟基吡嗪酸为4.75min（峰4），5-羟基吡嗪胺为5.31 min（峰5），黄嘌呤为5.90 min（峰6），吡嗪酸为7.35min（峰7），内标别嘌呤醇为8.53min（峰8），吡嗪胺为9.57min（峰9）。
例五、抗菌素分析
样 品：含有红霉素等5种抗菌素的混合物
色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪
配有570自动进样器，Rheadyane 77251进样阀，HP化学工作站
检测器：2000型ELSD Alltech 蒸发光散射检测器
漂移管温度为95℃，氮气流速为2.0L/min
色谱柱：AlltimaTM C18 ,5μm，柱长15cm，柱径4.6mm
流动相：A为0.2% 五氟丙酸, B为甲醇
梯 度：时间 0min 5min
A/B 55%/45% 35%/65%
流 速：1mL/ min
进 样：10μL
结 果：所有组分在6min之内全部流出，各组分完全分离，组分流出顺序为：峰1为红霉素，峰2为链霉素，峰3为托布霉素，峰4为阿米卡星，峰5为新霉素。
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