（1）试剂和材料 除特殊注明外，所用试剂均为分析纯，水为去离子水，符合GB／T582—1992二级用水的规定。
①甲醇：色谱纯
②乙腈：色谱纯
③固相萃取柱：Sep—pak Alumin B（500mg／6ml）
④N—甲基咪唑
⑤三氟乙酸酐
⑥伊维菌素标准品：纯度≥95％
⑦标准贮备液：准确称取伊维菌素标准品100mg，用乙腈溶解于100ml容量瓶中，制成lmg／m1标准贮备液，一20~C冰箱中保存，有效期3个月。
⑧标准工作液：将lmg／ml的标准贮备液用乙腈稀释成系列浓度的标准工作液。
⑨N—甲基咪唑—乙腈溶液：N—甲基咪唑—乙腈（1：1）。
⑩三氟乙酸酐—乙腈溶液：三氟乙酸酐—乙腈（1；2）。
（2）测定步骤
①提取 准确称取组织样品匀浆物（10000r／min匀浆1min） （2．00+0．05）g，置于50ml聚丙烯离心管中，加入乙腈6．0ml，涡旋混合lmin，7000r／min离心5min，上清液即为样品提取液。
②净化 将固相萃取柱用乙腈4ml预洗后，取样品提取液过柱，自然流出，收集于l0ml具塞试管中，再用乙腈3ml洗涤固相萃取柱，同样收集于l0ml具塞试管中。
③荧光衍生化 将试管中的溶液在500c下用氮气吹干，残存的微量水分在500c烘箱中烘15—20min。向试管中加入N—甲基咪唑—乙腈溶液100u1，涡旋混合30s后加入三氟乙酸酐—乙腈溶液150uL，试管内立即出现白雾并放热，立即将试管塞住，轻轻振荡，30s后加入甲醇750uL，静置15min后将溶液转移至1ml进样瓶中供分析。
④标准曲线的绘制 准确移取一定浓度的伊维菌素标准工作液，按上述方法进行荧光衍生化，上机测定。
⑤测定
a.色谱条件
色谱柱：C18柱
流动相：甲醇：水＝92；8
柱温：25~C
流速：1.0ml／min
进样量：50ul。
激发波长：365nm
发射波长：475nm
b．色谱测定 取适量试样溶液和相应的标准工作液，做单点或多点校准，以色谱峰面积积分值定量。标准工作液及试样液中伊维菌素的响应值均应在仪器检测的线性范围之内。
⑥空白试验 除不加试样外，按上述测定步骤进行。
（3）灵敏度和回收率
本方法在猪和鸡的肌肉、肝脏、肾脏、脂肪组织中测定伊维菌素的检测限为lug／kg
在10～50ug／kg添加浓度水平上，回收率范围为70％～90％。
