碘[125I]游离三碘甲腺原氨酸放射免疫分析药盒

 碘[125I]游离三碘甲腺原氨酸放射免疫分析药盒

【测定原理】 碘[125I]游离三碘甲腺原氨酸是利用放射免疫分析方法进行测定的。在均相竞争抑制反应中采用平衡法，用合成的FT₃衍生物为示踪剂，对病人血清样品中FT₃的含量进行直接测定。其特点是在免疫反应中，不与TBG结合，又具有与FT₃相同的抗原性。测定中校准品、样品等中的FT₃与¹²⁵I-FT₃竞争限量抗体的结合位。当被测样品中FT₃的含量高时，剩余的抗体结合位就少，从而与抗体结合的¹²⁵I-FT₃就少，反之亦然。利用分离试剂分离出抗原-抗体复合物，并测定其放射性计数。¹²⁵I-FT₃的结合量与样品中FT₃的含量呈函数关系，通过数据处理可求出样品中FT₃的含量。

 

【临床意义】    人体中甲状腺合成和分泌的T₃、T₄是控制人体代谢的主要内分泌激素，在血液循环中绝大部分T₃、T₄是以结合状态存在的，只有极少部分T₃、T₄以游离状态存在，但真正能够发挥生物活性的是游离部分（游离T₃占总T₃的0.3%，游离T₄占总T₄的0.03%左右），测定游离部分更能反映甲状腺功能状态的真正水平。总T₃、总T₄的测定，由于易受血液中甲状腺结合球蛋白TBG等蛋白浓度变化影响，故测定结果不很可靠（例如：因妊娠、新生儿、遗传性TBG增多症、传染性肝炎、使用雌激素、严重疾病、肾病综合症、遗传性TBG减少、肝硬化等引起TBG增高或减少），使总T₃、总T₄产生相应改变，而造成误诊。

 

【 碘[125I]游离三碘甲腺原氨酸操作方法】1.样品采集：取晨空腹静脉血，分离血清，备用。（2～8）℃放置可保存一周；若冰冻保存，可放置五周。脂血或溶血样品影响测定结果。2.实验方法：试管编号，按下表程序操作。                                                单位：μL

管别	校准品	样品	125I-FT3	蒸馏水	抗体	混匀，37℃温育（1.5 ～2）小时。	分离剂
总T管	--	--	100	--	--		--
NSB管	50（A）	--	100	100	--		500
S0管	50（A）	--	100	--	100		500
S1管～S末管	50	--	100	--	100		500
样品管	--	50	100	--	100		500

混匀，4℃放置15分钟，离心（3500转/分）15分钟，吸弃上清液，在放免仪上测定各管沉淀的放射性计数（cpm）。【数据处理】1.计算机处理：建议采用“对数计量-相对结合率的分数对数”〔log（dose）～logit（B_i/B）〕数学模型或四参数数学模型拟合。2.计算、绘图法：计算各管的百分结合率：以S₀（cpm数）为B₀，各校准管S_i（cpm数）为B_i，求各管的百分结合率。⑴.线性回归：用logX～logitY回归，求出r、a、b值，样品含量可由下式计算得出。    ⑵.绘图法：用各校准点计算的结果，在log～logit坐标纸上绘制校准曲线图，被测样品的含量可根据B_i/B₀的百分结合率从校准曲线图上查出。【正常参考值】  各实验室应建立自己的正常值；下列正常值仅供参考：     单位ng/dL： （0.40±0.10）〔（0.21～0.60）〕     单位pg/mL： （4.02±0.95）〔（2.07～5.97）〕单位pmol/L： （6.19±1.50）〔（3.20～9.20）〕【贮藏】 于（2～8）℃避光保存，不可冰冻。【 碘[125I]游离三碘甲腺原氨酸有效期】 一个月。