培养基的配置方法

   2024-02-18 互联网840
核心提示:培养基的配置方法膏蛋白胨培养基是一种天然培养基。牛肉膏是牛肉浸液的浓缩物,含有丰富的营养物质,不仅能为微生物提供碳源、氮

培养基的配置方法

膏蛋白胨培养基是一种天然培养基。牛肉膏是牛肉浸液的浓缩物,含有丰富的营养物质,不仅能为微生物提供碳源、氮源,还含有多种维生素。蛋白胨是酪蛋白、大豆蛋白或鱼粉等经过蛋白酶水解后,中间产物,含有胨和氨基酸等丰富的含氮素营养物,再加入的NaCl为细菌所需的无机盐,加入的自来水可提供微量元素。
配置好的培养基用湿热灭菌法进行灭菌。
三.材料和仪器:
1. 试剂:牛肉膏,蛋白胨,氯化钠,1mol/L NaOH,1mol/L HCl
2. 器皿:台秤,玻璃烧杯,搪瓷烧杯,三角瓶,量筒,沙漏,试管,玻棒等
3. 其他:PH试纸,牛角匙,牛皮纸,棉花,沙绳,灭菌锅等。
四.实验步骤:
1. 配方及配量:牛肉膏0.9g蛋白胨3g,氯化钠1.5g,琼脂条4.5g,水300mL,PH7.2~7.4。
2. 称取药品:按培养基配方及配量分别称取各药品,取少量水于烧杯中,将各培养基成分(除琼脂)逐一加入水中待溶。
3. 加热溶解:将搪瓷杯放到电热炉上,用文火加热,病不断搅拌,促使各药品快速溶解,然后补充水分至所需培养基的量。
4. 调节PH:初配好的牛肉膏蛋白胨,培养液是微酸性的,故需用1mol/L NaOH调PH7.2~7.4。
5. 加琼脂:向调好的培养基中加入琼脂条。
6. 加棉塞:用8层纱布纸杯成通气塞,灭菌前将方形纱布盖在瓶口,将其中间部位用手指塞入瓶口内,再将四角折叠成塞子状后加纸套包扎好,然后灭菌。
7. 包扎:在棉塞外再包上一层牛皮纸,以防灭菌时冷凝水直接沾湿棉塞及存放中防止尘埃等污染。
8. 灭菌:将待灭菌的培养基放入加压灭菌锅内,于121℃灭菌20min.
五.实验结果:
按照实验方法配制的培养基透明但有些发黄,说明说有物质均完全溶解,基本符合实验要求,颜色有些发黄可能是因为加入牛肉膏,也可能是因为加入牛肉膏的时候所用火温较高,使牛肉膏粘底了,稍有烧糊或烧焦了,致使培养基较黄。
一周以后观察, 配制的无菌牛肉膏蛋白胨固体培养基中,无菌落生成,说明配制的培养基符合要求.
六.思考题:配制牛肉膏蛋白胨斜面培养基有哪些操作步骤,哪几步易出差错?如何防止
答:配方及配量,称取药品,加热溶解,调PH,加琼脂,加棉塞,包扎,灭菌。
培养基的配置方法

 
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