大鼠胱氨酸elisa试剂盒概述

   2024-02-18 互联网1080
核心提示:hbzhan内容导读:Elisa试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较

hbzhan内容导读:Elisa试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗体ELISA检测。
  
  大鼠胱氨酸elisa试剂盒使用目的:
  
  本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中胱氨酸(cystine)含量。
  
  elisa试剂盒实验原理
  
  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠胱氨酸(cystine)水平。用纯化的大鼠胱氨酸(cystine)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胱氨酸(cystine),再与HRP标记的胱氨酸(cystine)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的胱氨酸(cystine)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠胱氨酸(cystine)浓度。
  
  elisa试剂盒组成
  
  130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶
  
  2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(2400pg/ml)0.5ml×1瓶
  
  3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶
  
  4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份
  
  5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张
  
  6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个
  
  标本要求
  
  1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
  
  2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
  
  elisa试剂盒操作步骤
  
  1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
  
  1200pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
  
  600pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
  
  300pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
  
  150pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
  
  75pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
  
  2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  
  3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  
  4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
  
  5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  
  6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
  
  7.温育:操作同3。
  
  8.洗涤:操作同5。
  
  9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
  
  10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  
  11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

 
举报收藏 0打赏 0评论 0
 
更多>同类资讯
推荐图文
推荐资讯
点击排行
网站首页  |  关于我们  |  联系方式  |  使用协议  |  版权隐私  |  隐私政策  |  网站地图  |  排名推广  |  广告服务  |  积分换礼  |  RSS订阅